Kan kültürü için kan alacak kişi steril eldiven giyer. Hastanın damarına girilecek deri bölgesi önce %70’lik alkol ile temizlenir ve kuruması beklenir. Sonra iyotlu solüsyon merkezden perifere doğru sürülerek cilt asepsisi sağlanır ve 2 dk kuruması beklenir. Bundan sonra hastanın damarı kesinlikle tekrar palpe edilmez. Gerekli miktar kan alındıktan sonra, kan kültür şişesinin tıpası açılır ve şişenin ağzı steril olmadığından mutlaka %70’lik alkolle silinmeli ve kuruması beklenmelidir. Alınan kan, kültür şişesi içerisine boşaltılmalı ve numune hızla laboratuvara ulaştırılmalıdır. Yeni doğan ve çocuklarda kiloya göre daha az kan (1-5 ml) alınmalıdır. Aynı işlem aynı anda diğer şişe için de yapılır. Genellikle kandaki mikroorganizmayı yakalamak için aynı anda çift numune önerilir. Bir koldan alındıysa diğer kola da aynı işlem uygulanarak alınabilir. Etken mikroorganizmayı yakalama ihtimalini artırmak için günde en az 3 set kan alınması tavsiye edilmektedir. Aşağıda kan alma tekniği ile ilgili bir şablon ekte sunulmuştur. (Kaynak: http://www.tmc-online.org/ Bu linkte ayrıca kan kültürleri ile ilgili “kan kültürü uygulama kılavuzu” da sunulmuştur. http://www.tmconline.org/pdf/bd/kan_kulturu_uygulama_klavuzu.pdf )